gnckКолопроктологияKoloproktologia2073-75562686-7303Russian Association of Coloproctology10.33878/2073-7556-2019-18-1-39-45gnck-1280Research ArticleСТАТЬЯ НОМЕРАLEADING ARTICLEИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЕ СВОБОДНЫХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ДЛЯ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ ПЕРИТОНЕАЛЬНОГО КАРЦИНОМАТОЗА ПРИ КОЛОРЕКТАЛЬНОМ РАКЕIMMUNE PHENOTYPING OF FREE TUMOUR CELLS FOR EARLY DIAGNOSIS OF PERITONEAL CARCINOMATOSIS IN COLORECTAL CANCERШелыгинЮ. А.ShelyginYu. A.noemail@neicon.ruОбразцовИ. В.ObraztsovI. V.noemail@neicon.ruСухинаМ. А.SukhinaM. A.noemail@neicon.ruАчкасовС. И.AchkasovS. I.noemail@neicon.ruКашниковВ. Н.KashnikovV. N.noemail@neicon.ruСушковО. И.SushkovO. I.noemail@neicon.ruСайфутдиноваК. Р.SayfutdinovaK. R.noemail@neicon.ruФГБУ «ГНЦК им. А.Н. Рыжих» МЗ РФРоссияState Scientific Centre for ColoproctologyRussian Federation201930032019181(67)3945Copyright © Шелыгин Ю.А., Образцов И.В., Сухина М.А., Ачкасов С.И., Кашников В.Н., Сушков О.И., Сайфутдинова К.Р., 20192019Шелыгин Ю.А., Образцов И.В., Сухина М.А., Ачкасов С.И., Кашников В.Н., Сушков О.И., Сайфутдинова К.Р.Shelygin Y.A., Obraztsov I.V., Sukhina M.A., Achkasov S.I., Kashnikov V.N., Sushkov O.I., Sayfutdinova K.R.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.ruproctology.com/jour/article/view/1280

ЦЕЛЬ: апробация метода выделения свободных интраперитонеальных клеток колоректального рака (КРР) для их фенотипирования и оценки эффективности внутрибрюшной гипертермической химиотерапии (ВБГХТ) митомицином С. ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ: обследовано 27 пациентов с КРР; у 10 пациентов перитонеальный лаваж выполнен перед и после ВБГХТ. Лаважную жидкость подвергали многостадийной процедуре очистки от фибрина; сконцентрированные клетки окрашивали антителами CD133 VioBright-FITCCD24 PE, CD26 ECD, CD184 PC5 и CD44 PC7 и выполняли проточную цитометрию. РЕЗУЛЬТАТЫ: выявлено повышение экспрессии CD133 (p<0,001) и CD184 (p<0,05) в группе больных с опухолями ободочной кишки. Вовлечение брыжеечных лимфоузлов характеризовалось увеличением экспрессии CD26 (p<0,05). Соотношение экспрессии CD44 / CD26 (p<0,05) было повышено у пациентов с карциноматозом брюшины. Под действием ВБХТ падает экспрессия CD24 у опухолевых стволовых клетках. ЗАКЛЮЧЕНИЕ: предложенный способ выделения и оценки свободных перитонеальных клеток КРР пригоден для применения в клинической практике, в частности, для оценки эффективности ВБГХТ. Показано подавляющее действие ВБГХТ на раковые стволовые клетки.

AIM: to test a method of free intraperitoneal colorectal cancer (CRC) cells isolation for the immunophenotyping and evaluation of mitomycin C hypertermic intraabdominal chemotherapy (HICT) PATIENTS AND METHODS: twenty-seven patients with CRC were included in the study.Peritoneal lavage prior and after HICT was performed for 10 of them. We defibrinated lavage fluid and stained concentrated tumour cells with monoclonal antibodies CD133 Vio Bright - FITC, CD24 PE, CD26 ECD, CD184 PC5 and CD44 PC7. FACS analysis was done after staining. RESULTS: patients with colon cancers had the increased expression of CD133 (p<0.001) and CD184 (p<0.05). Mesenteric lymph nodes involvement was followed by an increase of CD26 expression (p<0.05) in CD133+ cancer cells. The ratio of CD44/CD26 expression was increased in patients with peritoneal carcinomatosis (p<0.05). HICT lowers CD24 expression on CD133+ cancer stem cells. CONCLUSION: the method proposed for free peritoneal CRC cells identification and phenotyping can be used in clinical practice, particularly for evaluating the HICT efficacy. Suppressive effect of HICT on cancer stem cells is detected.

перитонеальный карциноматозопухолевые стволовые клеткивнутрибрюшинная химиотерапияфибринтрипсинperitoneal carcinomatosiscancer stem cellsintraperitoneal chemotherapyfibrintrypsinReferencesRathore, R. Colorectal Cancer. / R.Rathore //In: Ferri's Clinical Advisor. New York: Elsevier. - 2018 -p. 314-316.e1.Rathore, R. Colorectal Cancer. / R.Rathore //In: Ferri's Clinical Advisor. New York: Elsevier. - 2018 -p. 314-316.e1.Klaver, C.E. Recommendations and consensus on the treatment of peritoneal metastases of colorectal origin: a systematic review of national and international guidelines. / C.E.Klaver, H.Groenen, D.G.Morton et al.// Colorectal Dis. - 2017 Mar. - №19 (3). - р. 224-236.Klaver, C.E. Recommendations and consensus on the treatment of peritoneal metastases of colorectal origin: a systematic review of national and international guidelines. / C.E.Klaver, H.Groenen, D.G.Morton et al.// Colorectal Dis. - 2017 Mar. - №19 (3). - р. 224-236.Gelli, M. Strategies to prevent peritoneal carcinomatosis arising from colorectal cancer. / M.Gelli, J.F.Huguenin, C.Cerebelli et al. // Future Oncol. - 2017 Apr. - №13 (10). - р. 907-918.Gelli, M. Strategies to prevent peritoneal carcinomatosis arising from colorectal cancer. / M.Gelli, J.F.Huguenin, C.Cerebelli et al. // Future Oncol. - 2017 Apr. - №13 (10). - р. 907-918.Sibio, S. Detection methods and clinical significance of free peritoneal tumor cells found during colorectal cancer surgery. / S.Sibio, C.Fiorani, C.Stolfi et al. // World J. Gastrointest Surg. - 2015 Sep. 27. - №7 (9). -р. 178-84.Sibio, S. Detection methods and clinical significance of free peritoneal tumor cells found during colorectal cancer surgery. / S.Sibio, C.Fiorani, C.Stolfi et al. // World J. Gastrointest Surg. - 2015 Sep. 27. - №7 (9). -р. 178-84.Passot, G. Intra-operative peritoneal lavage for colorectal cancer. / G.Passot, K.Mohkam, E.Cotte et al. // World J. Gastroenterol. - 2014. - №20. -р. 1935-1939.Passot, G. Intra-operative peritoneal lavage for colorectal cancer. / G.Passot, K.Mohkam, E.Cotte et al. // World J. Gastroenterol. - 2014. - №20. -р. 1935-1939.Tsouma, A. Circulating tumor cells in colorectal cancer: detection methods and clinical significance. / A.Tsouma, C.Aggeli, N.Pissimissis et al. // Anticancer Res. - 2008. - №28. - р. 3945-3960.Tsouma, A. Circulating tumor cells in colorectal cancer: detection methods and clinical significance. / A.Tsouma, C.Aggeli, N.Pissimissis et al. // Anticancer Res. - 2008. - №28. - р. 3945-3960.Szarynska, M. Cancer stem cells as targets for DC-based immunotherapy of colorectal cancer. / M.Szarynska, A.Olejniczak, J.Kobiela et al. // Sci. Rep. - 2018 Aug 13. - №8 (1). - р. 12042.Szarynska, M. Cancer stem cells as targets for DC-based immunotherapy of colorectal cancer. / M.Szarynska, A.Olejniczak, J.Kobiela et al. // Sci. Rep. - 2018 Aug 13. - №8 (1). - р. 12042.Rosiq, S. Colonic Stem Cells Expression of Lgr5 and CD133 Proteins as Predictive Markers in Colorectal Cancer among Egyptian Patients. / S.Rosiq, O.Hammam, A.Abdelalim et al. // Open Access Maced. J. Med. Sci. -2018 Jun 7. - №6 (6). - р. 968-974.Rosiq, S. Colonic Stem Cells Expression of Lgr5 and CD133 Proteins as Predictive Markers in Colorectal Cancer among Egyptian Patients. / S.Rosiq, O.Hammam, A.Abdelalim et al. // Open Access Maced. J. Med. Sci. -2018 Jun 7. - №6 (6). - р. 968-974.Xi, J. Suppression of GRP78 sensitizes human colorectal cancer cells to oxaliplatin by downregulation of CD24. / J.Xi, Y.Chen, S.Huang et al. // Oncol. Lett. - 2018 Jun. - №15 (6). - р. 9861-9867.Xi, J. Suppression of GRP78 sensitizes human colorectal cancer cells to oxaliplatin by downregulation of CD24. / J.Xi, Y.Chen, S.Huang et al. // Oncol. Lett. - 2018 Jun. - №15 (6). - р. 9861-9867.Wang, X. CD24 promoted cancer cell angiogenesis via Hsp90-mediated STAT3/VEGF signaling pathway in colorectal cancer. / X.Wang, Y.Zhang, Y.Zhao et al. // Oncotarget. - 2016 Aug 23. - №7 (34). - р. 5566355676.Wang, X. CD24 promoted cancer cell angiogenesis via Hsp90-mediated STAT3/VEGF signaling pathway in colorectal cancer. / X.Wang, Y.Zhang, Y.Zhao et al. // Oncotarget. - 2016 Aug 23. - №7 (34). - р. 5566355676.Larrinaga, G. Dipeptidyl-peptidase IV activity is correlated with colorectal cancer prognosis. / G.Larrinaga, I.Perez, B.Sanz et al. // PLoS One. - 2015 Mar 19. - №10 (3). - e0119436.Larrinaga, G. Dipeptidyl-peptidase IV activity is correlated with colorectal cancer prognosis. / G.Larrinaga, I.Perez, B.Sanz et al. // PLoS One. - 2015 Mar 19. - №10 (3). - e0119436.Amara, S. Stromal cell derived factor-1 and CXCR4 expression in colorectal cancer promote liver metastasis. / S.Amara, I.Chaar, M.Khiari et al. //Cancer Biomark. - 2015. - №15 (6). - р. 869-79.Amara, S. Stromal cell derived factor-1 and CXCR4 expression in colorectal cancer promote liver metastasis. / S.Amara, I.Chaar, M.Khiari et al. //Cancer Biomark. - 2015. - №15 (6). - р. 869-79.Jin, J. CXCR3 expression in colorectal cancer cells enhanced invasion through preventing CXCR4 internalization. / J.Jin, Z.Zhang, H.Wang et al.// Exp. Cell Res. - 2018 Aug 7. - pii: S0014-4827(18)30657-8.Jin, J. CXCR3 expression in colorectal cancer cells enhanced invasion through preventing CXCR4 internalization. / J.Jin, Z.Zhang, H.Wang et al.// Exp. Cell Res. - 2018 Aug 7. - pii: S0014-4827(18)30657-8.Mohamed, S.Y. The Prognostic Value of Cancer Stem Cell Markers (Notchl, ALDH1, and CD44) in Primary Colorectal Carcinoma. / S.Y.Mohamed, R.M.Kaf M.M.Ahmed et al. // J. Gastrointest Cancer. - 2018 Aug 23. - doi: 10.1007/s12029-018-0156-6.Mohamed, S.Y. The Prognostic Value of Cancer Stem Cell Markers (Notchl, ALDH1, and CD44) in Primary Colorectal Carcinoma. / S.Y.Mohamed, R.M.Kaf M.M.Ahmed et al. // J. Gastrointest Cancer. - 2018 Aug 23. - doi: 10.1007/s12029-018-0156-6.Jing, F. Colon cancer stem cell markers CD44 and CD133 in patients with colorectal cancer and synchronous hepatic metastases. / F.Jing, H.J.Kim, C.H.Kim et al.// Int. J. Oncol. - 2015 Apr. - №46 (4). -p. 1582-8.Jing, F. Colon cancer stem cell markers CD44 and CD133 in patients with colorectal cancer and synchronous hepatic metastases. / F.Jing, H.J.Kim, C.H.Kim et al.// Int. J. Oncol. - 2015 Apr. - №46 (4). -p. 1582-8.Сушков, О.И. Перитонеальный карциноматоз при раке толстой кишки. подходы к лечению (обзор литературы). / О.И.Сушков, С.И.Ачкасов // Колопроктология. - 2016. - №4 (58). - с. 69-79.Сушков, О.И. Перитонеальный карциноматоз при раке толстой кишки. подходы к лечению (обзор литературы). / О.И.Сушков, С.И.Ачкасов // Колопроктология. - 2016. - №4 (58). - с. 69-79.Vernon, H.M. The conditions of action of «trypsin» on fibrin J Physiol. / H.M.Vernon // 1901. - Jun 14. -№26 (6). - р. 405-426.Vernon, H.M. The conditions of action of «trypsin» on fibrin J Physiol. / H.M.Vernon // 1901. - Jun 14. -№26 (6). - р. 405-426.Lam, C.S. Prognostic significance of CD26 in patients with colorectal cancer. / C.S.Lam, A.H.Cheung, S.K.Wong et al. // PLoS One. - 2014 May 28. - №9 (5). -e98582.Lam, C.S. Prognostic significance of CD26 in patients with colorectal cancer. / C.S.Lam, A.H.Cheung, S.K.Wong et al. // PLoS One. - 2014 May 28. - №9 (5). -e98582.Pang, R. A subpopulation of CD26+ cancer stem cells with metastatic capacity in human colorectal cancer. / R.Pang, W.L.Law, A.C.Chu et al. // Cell Stem. Cell. - 2010 Jun 4. - №6 (6). - р. 603-15.Pang, R. A subpopulation of CD26+ cancer stem cells with metastatic capacity in human colorectal cancer. / R.Pang, W.L.Law, A.C.Chu et al. // Cell Stem. Cell. - 2010 Jun 4. - №6 (6). - р. 603-15.Yanm Y. Concise Review: Emerging Role of CD44 in Cancer Stem Cells. / Yan Y., Zuo X., Wei D. // A Promising Biomarker and Therapeutic Target Stem Cells Transl Med. - 2015 Sep. - №4 (9). - р. 1033-43.Yanm Y. Concise Review: Emerging Role of CD44 in Cancer Stem Cells. / Yan Y., Zuo X., Wei D. // A Promising Biomarker and Therapeutic Target Stem Cells Transl Med. - 2015 Sep. - №4 (9). - р. 1033-43.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.